本產品是經基因工程改造的熱穩定T7 RNA聚合酶，對噬菌體T7啟動子序列具有高度特異性，跟野生型噬菌體T7 RNA聚合酶相比，它可在更高的溫度下進行反應。High T7 RNA Polymerase可在37~52℃條件下進行高效的體外轉錄。

High T7 RNA Polymerase

貨號：T0125

儲(chu) 運條件 ：-20℃

產(chan) 品組成

產(chan) 品簡介

本產(chan) 品是經基因工程改造的熱穩定T7 RNA聚合酶，對噬菌體(ti) T7啟動子序列具有高度特異性，跟野生型噬菌體(ti) T7 RNA聚合酶相比，它可在更高的溫度下進行反應。High T7 RNA Polymerase可在37~52℃條件下進行高效的體(ti) 外轉錄。

活性定義(yi)

1活性單位(U)是指在50℃ 1 h內(nei) 使1 nmol ATP摻入酸不溶性沉澱物所需要的酶量。

適用範圍

1. 合成單鏈RNA,包括mRNA,siRNA, gRNA等各類RNA的前體(ti) 。

2. 合成標記或未標記的高特異性RNA探針。

3. 利用帽子類似物合成加帽的mRNA。

質量控製

蛋白純度檢測

本品經SDS-PAGE檢測純度≥95%。

核酸內(nei) 切酶殘留檢測

將酶液與(yu) 超螺旋質粒DNA在37℃溫育4 h，通過DNA電泳檢測質粒無變化。

DNase 殘留檢測

將酶液與(yu) 雙鏈DNA 底物在 37℃溫育 16 h，通過 DNA 電泳檢測雙鏈DNA底物無變化。

RNase殘留檢測

將酶液與(yu)   RNA 在 37℃溫育 1 h，通過電泳檢測 RNA 無降解。

功能檢測

體(ti) 外轉錄合成實驗，通過 RNA 電泳可以檢測到目的條帶。 

使用方法

推薦反應體(ti) 係（20 μl）

 注:建議加完Nuclease-Free Water，再加CTP/GTP/ATP/UTP。

推薦反應條件

50℃反應 1 h。

反應結束後，可向上述 20μl 反應液中加入1μl dsDNase，37℃孵育15 min用於(yu) 去除DNA模板。

注意事項

1. 模板 DNA 的純度對體(ti) 外轉錄反應至關(guan) 重要。質粒DNA抽提過程中引入的RNase A殘留會(hui) 顯著影響轉錄RNA的質量，建議使用OD260/280為(wei) 1.8~2.0的高純度 RNase-free 質粒。

2. 模板DNA可通過線性化環狀質粒或PCR 獲得。模板DNA上遊需含有T7啟動子序列，下遊為(wei) 平末端或編碼鏈5' 末端突出。

3. 為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套及口罩進行實驗操作。