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細胞與(yu) 免疫學試劑
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ray.雷竞技(Lipo3000)
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | TR002 |
---|---|---|---|
規格 | 0.75ML,1.5ML | 供貨周期 | 現貨 |
ray.雷竞技Lipo3000
產(chan) 品貨號:TR002
存儲(chu) 條件:2-4℃保存1年。(避免冷凍)
產(chan) 品說明
LABLEAD Lipo3000試劑采用了脂質納米顆粒(Lipid Nanoparticle)LNP遞送技術, 利用脂質形成納米微粒將核酸包裹起來形成核酸脂質納米粒,實現高轉染性和可重複性的實驗結果。其可針對廣泛類型的常見及難轉染細胞,實現超高轉染效率,同時提供更高的細胞活力。Lipo3000對大多數細胞毒性低並且性質溫和,並且我們(men) 優(you) 化了轉染過程的全部四個(ge) 步驟,並結合脂質體(ti) 納米顆粒(LNP)遞送技術,實現了較高的轉染性能並可以降低所需的試劑量,同時盡可能降低對細胞係產(chan) 生毒性的風險。對多種類型的細胞和培養(yang) 板都具有高轉染效率;轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(you) 點。
適用範圍:貼壁細胞和懸浮細胞(哺乳動物細胞係)的轉染。
產(chan) 品特點:
1) 卓yue的轉染效率—針對較難轉染細胞,可將效率提升2~10倍
2) 作用溫和,細胞毒性低—可改善細胞活力
3) 高性價(jia) 比高,同時實現更好的轉染結果
使用方法
DNA的轉染
對大多數細胞來說,轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平,並能減少細胞毒性。
1.接種細胞至70-90%匯合度時轉染。
2.按照下表使用Opti-MEM培養(yang) 基稀釋Lipo3000-B試劑(建議同時用2管),充分混勻
3.使用Opti-MEM培養(yang) 基稀釋DNA,製備DNA預混液,然後添加Lipo3000-A 試劑,充分混勻。
4.在每管已稀釋的Lipo3000-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例)。
5.室溫孵育5分鍾。
6.加入DNA-脂質體(ti) 複合物至細胞中。
7.37℃孵育細胞2-4天。然後分析轉染細胞。
siRNA轉染
轉染siRNA至細胞中時,遵循如上所述的DNA實驗方案,但在稀釋siRNA時不要加入Lipo3000-A試劑(第3步)。
細胞培養(yang) 容器 | 96-well | 24-well | 6-well | |
貼壁細胞 | 1~4×104 | 0.5~2×105 | 0.25~1×106 | |
Opti-MEM培養(yang) 基稀釋Lipo3000-B試劑(建議同時用2管) | Opti-MEM培養(yang) 基 | 5ul×2 | 25ul×2 | 125ul×2 |
Lipo3000-B | 0.15和0.3ul | 0.75和1.5ul | 3.75和7.5ul | |
Opti-MEM培養(yang) 基稀釋DNA,製備DNA預混液,然後添加Lipo3000-A試劑,充分混勻 | Opti-MEM培養(yang) 基 | 10uL | 50ul | 250ul |
DNA (0.5–5 ug/ul) | 0.2ug | 1ug | 5ug | |
Lipo3000-A試劑(2 ul/ug DNA) | 0.4ul | 2ul | 10ul | |
Lipo3000-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例) | 稀釋的DNA | 5ul | 25ul | 125ul |
稀釋的Lipo3000-B | 5ul | 25ul | 125ul | |
室溫孵育5分鍾 | ||||
加入DNA-脂質體(ti) 複合物至細胞中 | 96-well | 24-well | 6-well | |
DNA-脂質體(ti) 複合物 | 10uL | 50ul | 250ul | |
37°C孵育細胞2–4天。然後分析轉染細胞。 |
特別提醒:
本公司所有產(chan) 品僅(jin) 供專(zhuan) 業(ye) 人員用於(yu) 生命科學研究,不得用於(yu) 臨(lin) 床診斷或治療,不得用於(yu) 食品或藥品,不得存放於(yu) 普通住宅。
常見細胞的轉染效率(僅(jin) 供參考,實驗條件不同轉染效率會(hui) 有較大差別)