3xFlag Peptide (3X Flag多肽)是一種常用於通過競爭性結合Anti-Flag抗體，從而在免疫沉澱時洗脫與Anti-Flag抗體結合的Flag融合表達蛋白的多肽。本產品用於免疫沉澱時Flag融合表達蛋白的洗脫。3X Flag Peptide (3X Flag多肽)由23個氨基酸組成，含有3組Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp重複多肽。

3xFlag peptide

貨號：F1001

存儲(chu) 條件：-20ºC保存，至少一年有效。粉末裝也可以4ºC保存，一年有效。

產(chan) 品簡介

3X Flag Peptide (3X Flag多肽)是一種常用於(yu) 通過競爭(zheng) 性結合Anti-Flag抗體(ti) ，從(cong) 而在免疫沉澱時洗脫與(yu) Anti-Flag抗體(ti) 結合的Flag融合表達蛋白的多肽。本產(chan) 品用於(yu) 免疫沉澱時Flag融合表達蛋白的洗脫。3X Flag Peptide (3X Flag多肽)由23個(ge) 氨基酸組成，含有3組Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp重複多肽。在C端的8個(ge) 氨基酸組成經典的Flag標簽(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys; DYKDDDDK)。

3X Flag Peptide (3X Flag多肽)的主要參數

使用說明：

1、粉末裝由於(yu) 微量的多肽在凍幹過程中沉積在管內(nei) ，形成很薄或不可見的多肽層，所以在打開管蓋前，建議在離心機中約8,000-12,000×g離心10-30秒，使附著在管蓋或管壁上的多肽聚集於(yu) 管底。

2、溶解時使用TBS進行溶液，用移液槍的槍頭輕吹幾下或者輕輕搖晃瓶子，即可使多肽wan全溶解。請勿用vortex劇烈振蕩，以免多肽變性而失活；溶液裝可直接用於(yu) 後續配製。

3、免疫沉澱樣品的3X Flag競爭(zheng) 洗脫法：本方法為(wei) 非變性法，洗脫效率高且洗脫後的樣品中不含Flag抗體(ti) 的輕鏈和重鏈。

3.1 3X Flag多肽洗脫液的配製：根據樣品量確定洗脫液的用量，取一定量3X Flag多肽儲(chu) 存液用TBS溶液進一步稀釋3X Flag多肽溶液至150μg/ml。

3.2 每個(ge) 免疫沉澱樣品加入100μl 3X Flag多肽洗脫液(150μg/ml)，冰浴並搖晃孵育30分鍾-2小時，為(wei) 了提高洗脫效率，可延長孵育時間或重複洗脫。3X Flag多肽洗脫液體(ti) 積一般為(wei) 凝膠懸液的5倍。

3.3 4ºC，6000×g離心30秒，小心轉移上清至新管中，上清即為(wei) 洗脫的Flag融合蛋白。注意不要吸到凝膠。

3.4 洗脫的Flag融合蛋白置於(yu) 4ºC待用，或者-20ºC長期保存。