Esp3I 限製性內(nei) 切酶

產(chan) 品貨號：F1503S

儲(chu) 存條件：-20℃

同裂酶：BsmBI, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I

注： 同裂酶對於(yu) 不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性

產品組成

產(chan) 品簡介

LabFD™快速內(nei) 切酶是一係列經過基因工程重組、能夠在 5~15 分鍾內(nei) 精確完成 DNA 切割的高保真限製性內(nei) 切酶，適用於(yu) 質粒DNA、PCR 產(chan) 物或基因組DNA 等的快速酶切。LabFD™快速內(nei) 切酶具有如下特點：5~15 分鍾內(nei) 即可完成酶切；共用一種酶切 Buffer，大大簡化酶切反應體(ti) 係；良好的酶活冗餘(yu) 度， 輕鬆應對底物過量或困難模板酶切。此外，LABLEAD去磷酸化、連接試劑在 LabFD™酶切 Buffer 中具有baifenzhibai活性，支持一管化反應，提升“酶切-修飾-連接"的體(ti) 驗。

建議反應條件

1×LabFD™緩衝(chong) 液；37℃溫育；參照“DNA 快速酶切流程"配製反應體(ti) 係。

失活條件

80℃溫育 20 min。

功能活性檢測

最shi反應溫度下，在 20ul 反應體(ti) 係中，1ulLabFD™ Esp3I 能夠在 15min 內(nei) *消化 1ug λDNA。

超長時間溫育檢測

最shi反應溫度下，將 1ul LabFD™ Esp3I 與(yu) 1ug λDNA 共同溫育 3h，未檢測到其他核酸酶汙染或星號活性引起的底物非特異性降解，延時酶切可能出現星號活性。

酶切-連接-再酶切檢測

最shi反應溫度下，使用 1ul LabFD™ Esp3I 消化底物，回收酶切產(chan) 物。在 22℃下使用適量 Fast T4 DNA Ligase 可以將酶切產(chan) 物重新連接。將連接產(chan) 物再次回收後，使用相同的內(nei) 切酶可以重新切開連接產(chan) 物。

非特異性內切酶活性檢測

最shi反應溫度下，將 1ul LabFD™ Esp3I 與(yu) 1ug 超螺旋質粒 DNA 共同溫育 4h，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，質粒 DNA 仍然處於(yu) 超螺旋狀態。