DiI 細胞膜橙色熒光探針是一種親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構，進入細胞膜後，DiI在整個細胞膜上擴散，最jia濃度時可以使整個細胞膜染色。

DiI 細胞膜橙色熒光探針

產(chan) 品貨號：D2210

儲(chu) 存條件：-20℃

產(chan) 品描述

DiI是一種親(qin) 脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構，進入細胞膜後，DiI在整個(ge) 細胞膜上擴散，最jia濃度時可以使整個(ge) 細胞膜染色。DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與(yu) 細胞膜結合後其熒光強度大大增強，DiI被激發後可以發出橙紅色的熒光，具有很高的淬滅常數，中等強度的光量子和很短的激發態壽命。可以用標準的TRITC濾光片檢測。

DiI通常不會(hui) 明顯影響細胞的生存力，因此被廣泛用於(yu) 正向或逆向的，活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑（long-term tracer）。除了最jian單的細胞膜熒光標記外，還可以用於(yu) 檢測細胞的融合和粘附，檢測發育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

產(chan) 品性質

使用方法

1. DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液製備

（1）配置DMSO或EtOH 儲(chu) 存液：儲(chu) 存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。

注意：未使用的儲(chu) 存液保存在-20°C，避免反複凍融。

（2）工作液製備：用合適的緩衝(chong) 液（如：無血清培養(yang) 基，HBSS或PBS）稀釋儲(chu) 存液，配製濃度為(wei) 1～5 µM的工作液。

注意：工作液的最終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配製。可以從(cong) 推薦濃度的十倍以上尋找最jia條件。

2. 懸浮細胞染色

（1）懸浮細胞密度為(wei) 1 × 106/mL加入到工作液中。

（2）在37 ℃培養(yang) 細胞 2～20分鍾，不同的細胞最jia培養(yang) 時間不同。

（3）染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鍾。

（4）傾(qing) 倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養(yang) 液。

（5）重複（3），（4）步驟兩(liang) 次以上。

3. 粘壁細胞的染色

（1）使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yang) 。

（2）從(cong) 培養(yang) 基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yang) 液，將蓋玻片放在潮濕的環境中。

（3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

（4）在37 ℃培養(yang) 細胞 2～20分鍾，不同的細胞最jia培養(yang) 時間不同。

（5）吸幹染料工作液，用培養(yang) 液洗蓋玻片2～3次，每次用預溫的培養(yang) 基覆蓋所有細胞，培養(yang) 5～10分鍾，然後吸幹培養(yang) 基。

4. 顯微鏡檢測

（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。

（2）多色染料的同時檢測，濾光器按照以下設定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005

5. 流式細胞儀(yi) 的檢測

DiD，DiO，DiI，DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經典的FL1，FL2，FL3和FL4流式細胞儀(yi) 檢測。

注意事項

為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

本品僅(jin) 用於(yu) 實驗研究。