LabFect原代細胞小核酸ray.雷竞技可用來轉染 siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內的小分子RNA和DNA，可轉染絕大多數原代細胞。

LabFect原代細胞小核酸ray.雷竞技

貨號：T1014

存儲(chu) 條件：藍冰運輸，4°C保存，超一個(ge) 月不用於(yu) -20°C儲(chu) 存，避免反複凍融。-20℃保存條件下，有效期為(wei) 1年。

產(chan) 品說明：

LabFect可用來轉染 siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內(nei) 的小分子RNA和DNA，可轉染絕大多數原代細胞。 目前，無論國外還是國內(nei) ，原代細胞的核酸轉染都是個(ge) 熱點難題，市場還缺乏真正有效的商品化的原代細胞核酸ray.雷竞技。LabFect能夠高效轉染絕大多數原代細胞，獲得比較理想的基因敲除效果。甚至對一些活體(ti) 寄生蟲幼蟲，LabFect也能獲得較為(wei) 理想的轉染結果。對於(yu) 大多數原代細胞，LabFect的細胞轉染陽性率都在80%以上，而轉染細胞死亡率不到10%。LabFect的使用也極其簡便，先將siRNA與(yu) LabFect室溫混合，再將siRNA-LabFectPM混合物直接加入含培養(yang) 基的細胞，血清對轉染效果沒有影響，不必刻意添加或更換培養(yang) 液。

產(chan) 品特點：

卓yue的原代細胞轉染性能：細胞轉染陽性率一般在80%以上，基因敲除效果明顯，肝細胞 Lamin A/C 基因敲除效率在95%以上；

極低的細胞毒性：轉染細胞死亡率不到 10%，大大降低了因細胞毒性 對實驗結果的影響；

轉染細胞範圍廣，絕大多數原代細胞都能獲得比較理想的轉染結果。

應用：

siRNA 轉染

antisense RNA 轉染

200bp 內(nei) 的小分子 DNA 轉染

操作步驟：

本說明書(shu) 適用於(yu) 24孔培養(yang) 板的轉染實驗，其他規格的培養(yang) 板的用量參照下麵表格，表格給出的是每孔的用量與(yu) 體(ti) 積。

1. 細胞接種：

轉染前一天接種細胞，每孔500μl培養(yang) 基，使細胞在轉染時密度在30-50%，盡量不要使用抗生素。

2. siRNA-LabFect混合物準備：

a. 6pmol siRNA用50μl無血清培養(yang) 基稀釋。

b. 2μl LabFect 用50μl無血清培養(yang) 基稀釋。輕輕混勻，室溫孵育 5min。注意：確保在25 min內(nei) 執行第三步操作，不要過於(yu) 延遲。

c. 孵育5min後，將siRNA稀釋液與(yu) LabFect稀釋液混合（總體(ti) 積100μl）。輕輕混勻，室溫孵育20 min。

3. 將混合物加到培養(yang) 的細胞內(nei) （*培養(yang) 基培養(yang) ）：

a. 將100μl混合物加入培養(yang) 孔內(nei) ，培養(yang) 孔內(nei) 含有0.5ml培養(yang) 的細胞。輕輕晃動培養(yang) 板，混勻。

b. 37°C 培養(yang) 18-72h，檢測基因抑製效果。如果需要，細胞培養(yang) 4-6h 時可以更換培養(yang) 基，但不是必須。孵育時間的長短，取決(jue) 於(yu) 細胞類型、 所幹擾基因本身及分析方法。可設置不同的孵育時間進行實驗以確定最jia孵育時間。

轉染實驗優(you) 化：

為(wei) 了提高轉染效率，最hao對轉染條件進行優(you) 化，特別是首ci使用。例如：24孔培養(yang) 板，調整siRNA與(yu) LabFect試劑的用量。siRNA用量在0.6-30 pmol (final concentration 1-50 nM)之間調整，LabFect試劑用量在1.0-3.0μl之間調整。

轉染實驗要點：

轉染過程盡量不要使用抗生素，否則會(hui) 導致細胞死亡增加； 首ci實驗 siRNA 的用量設置在終濃度 10nM、30nM、50nM、100 nM 進行摸索 ，後續實驗根據實驗結果修改。

質量控製

本產(chan) 品經嚴(yan) 格的質量檢驗證明，無生物汙染

注意：

本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研實驗

LabFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels