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線性PEIray.雷竞技
產品簡介

是由一種陽離子聚合物ray.雷竞技,分子量40000,它能與核酸形成複合物,並使該複合物進入哺乳動物細胞。線性PEIray.雷竞技適用廣泛。該試劑可在含血清與抗生素的*培養基中發揮作用,實驗操作簡單,對大多數培養細胞都有較高的轉染效率,並且細胞毒性較低。

產品型號:
更新時間:2025-01-03
廠商性質:代理商
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品牌其他品牌貨號P4000
規格100mg,1g供貨周期現貨

線性PEIray.雷竞技

產(chan) 品貨號:P4000

存儲(chu) 條件:室溫運輸,粉末在室溫或4 ºC保存,有效期2年。儲(chu) 存液 在4 ºC保存,有效期至少6個(ge) 月。

產(chan) 品簡介:

Polyethylenimine Linear(PEI)溶液是由一種陽離子聚合物ray.雷竞技,分子量40000,它能與(yu) 核酸形成複合物,並使該複合物進入哺乳動物細胞。線性PEIray.雷竞技適用廣泛。該試劑可在含血清與(yu) 抗生素的*培養(yang) 基中發揮作用,即使在有血清存在的情況下,它仍然能高效的將核酸導入細胞。實驗操作簡單,對大多數培養(yang) 細胞都有較高的轉染效率(用於(yu) 常見細胞係,如HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等),並且細胞毒性較低。

儲(chu) 存液配置(1 mg/mL)

1.材料

PEI 40000、Milli-Q® 水/注射用水(WFI)或類似的生物級水、1 mol/L氫氧化鈉(NaOH)、一次性0.1~0.2 μm PES真空無菌過濾器、無菌HDPE或聚丙烯儲(chu) 存瓶。

2. 配置儲(chu) 存液(1 mg/mL)

1)於(yu) 1 L玻璃燒杯,將1g PEI 40000粉末加入900 mL Milli-Q®超純水或其他相當級別的生物用水中,在磁子攪拌器上攪拌均勻,產(chan) 生小渦;

2)待PEI 40000*溶解(通常不到5min);

3)邊攪拌邊滴加1 mol/L氫氧化鈉溶液,調節pH為(wei) 6.90~7.10;

注:如果pH值>7.10,請使用鹽酸將pH值調至6.90~7.10;

4)將溶液轉入量筒內(nei) ,並加水定容到1 L;

5)用一次性0.1~0.2 µm PES真空過濾器過濾除菌,即得到1 mg/mL的儲(chu) 存液;

6)根據需要分裝並儲(chu) 存在4 °C,至少6個(ge) 月穩定。

操作流程(以6孔板為(wei) 例)

1.細胞鋪板

提前一天將細胞種植在六孔板中,以轉染時細胞密度在70%~80%為(wei) 宜。

2.轉染過程

1)在轉染前2h,移除細胞上原有的培養(yang) 基,換為(wei) 新鮮的*培養(yang) 基。

2)將2ug質粒DNA用50uL無血清稀釋液稀釋,充分混勻製成DNA稀釋液。

注意:無血清稀釋液建議采用Opti-MEM或ddH2O。

3)向DNA稀釋液中直接加入4uLray.雷竞技,室溫靜置10~15min。轉染複合物配製完成。

4)將轉染複合物加入細胞培養(yang) 基中,輕柔混勻。

5)繼續培養(yang) 24~48h,收取細胞進行鑒定或加入相應抗生素篩選穩定克隆。

6)使用本產(chan) 品轉染後一般在24h開始進入表達高峰期,36~48h達到表達高峰,相對於(yu) 脂質體(ti) 轉染試劉,達到峰值的時間延後約6~12h。

不同細胞培養(yang) 容器轉染用量:

細胞培養(yang) 容器

表麵積

稀釋液體(ti) 積

DNA的量

ray.雷竞技的量

培養(yang) 基總量

96-well

0.3cm2

10uL

0.1ug

0.1uL

100uL

48-well

0.7cm2

20uL

0.2ug

0.3uL

200uL

24-well

1.9cm2

50uL

0.5ug

1uL

500uL

12-well

3.8cm2

50uL

1ug

2uL

1mL

6-well/35mmdish

10cm2

100uL

2ug

4uL

2mL

60mm dish/T25flask

21cm2

200uL

4ug

8uL

4mL

100mm dish/T75flask

58cm2

500uL

10ug

20uL

10mL


注意事項:

1、對大多數細胞來而言,每1μg DNA 使用3.0μL PEI MAXray.雷竞技都能獲得較高轉染效率。也可嚐試每1μg DNA使用 1.5~4 μL體(ti) 積線性PEI 40000ray.雷竞技進行優(you) 化。

2、為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套及通風櫥操作。

3、本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研用途,不可用於(yu) 人體(ti) 。

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