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懸浮細胞小核酸ray.雷竞技
產品簡介

懸浮細胞小核酸ray.雷竞技能夠高效轉染絕大多數懸浮細胞,獲得比較理想的基因敲除效果。對於大多數懸浮細胞,LabFect 的細胞轉染陽性率都在 75%以上,而轉染細胞死亡率不到10%。LabFect 的使用也極其簡便,先將 sRNA 與 LabFect 室溫混合,再將siRNA-LabFect 混合物直接加入含培養基的細胞,血清對轉染效果沒有影響,不必刻意添加或更換培養液。

產品型號:
更新時間:2022-08-17
廠商性質:代理商
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品牌其他品牌貨號T1024
規格1ML供貨周期現貨

LabFect SP懸浮細胞小核酸ray.雷竞技

 

貨號T1024

存儲(chu) 條件藍冰運輸,4°C 保存,超一個(ge) 月不用於(yu) -20°C儲(chu) 存,-20℃保存條件下,有效期為(wei) 1 年。避免反複凍融。

 

產(chan) 品特點:

卓yue的懸浮細胞轉染性能:細胞轉染陽性率一般在75%以上,基因敲除效率在80%以上;

極低的細胞毒性:轉染細胞死亡率不到10%,大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響;

轉染細胞範圍廣,絕大多數懸浮細胞都能獲得比較理想的轉染結果。

 

產(chan) 品介紹

LabFect 可用來轉染 siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor 等 200bp 以內(nei) 的小分子 RNA,可轉染絕大多數懸浮細胞。目前, 無論國外還是國內(nei) ,懸浮細胞的核酸轉染都是個(ge) 熱點難題,市場還缺乏真正有效的商品化的懸浮細胞小核酸ray.雷竞技。LabFect 能夠高效轉染絕大多數懸浮細胞,獲得比較理想的基因敲除效果。對於(yu) 大多數懸浮細胞,LabFect 的細胞轉染陽性率都在 75%以上,而轉染細胞死亡率不到10%。LabFect 的使用也極其簡便,先將 sRNA 與(yu) LabFect 室溫混合,再將siRNA-LabFect 混合物直接加入含培養(yang) 基的細胞,血清對轉染效果沒有影響,不必刻意添加或更換培養(yang) 液。

 

應用

siRNA 轉染

antisense RNA 轉染

200bp 內(nei) 的小分子 DNA 轉染


質量控製

本產(chan) 品經嚴(yan) 格的質量檢驗證明,無生物汙染。

 

操作步驟:本說明書(shu) 適用於(yu) 24孔培養(yang) 板的轉染實驗,其他規格的培養(yang) 板的用量參照下麵表格,表格給出的是每孔的用量與(yu) 體(ti) 積。 

1. 細胞接種:轉染前一天接種細胞,每孔500 μl培養(yang) 基,使細胞在轉染時密度在30-50%,盡量不要使用抗生素

2.  siRNA-Labfect SP混合物準備:

2.1  6pmol siRNA 用 50μl 無血清培養(yang) 基稀釋。

2.2  2μl Labfect SP用 50μl 無血清培養(yang) 基稀釋。輕輕混勻,室溫孵育 5min。

注意:確保在 25 min 內(nei) 執行第三步操作,不要過於(yu) 延遲。   

2.3 孵育 5min 後,將 siRNA 稀釋液與(yu)  Labfect SP稀釋液混合(總體(ti) 積 100μl)。輕輕混勻,室溫孵育 20 min。

3.  將混合物加到培養(yang) 的細胞內(nei) (*培養(yang) 基培養(yang) ):

3.1  100μl混合物加入培養(yang) 孔內(nei) ,培養(yang) 孔內(nei) 含有 0.5ml 培養(yang) 的細胞。輕輕晃動培養(yang) 板 5min,混勻。

3.2  37°C培養(yang) 48-72h,檢測基因抑製效果。如果需要,細胞培養(yang) 4-6h時可以更換培養(yang) 基,但不是必須。孵育時間的長短,取決(jue) 於(yu) 細胞類型、 所幹擾基因本身及分析方法。可設置不同的孵育時間進行實驗以確定最jia孵育時間。

 

注意事項:

1. 懸浮細胞轉染難度較大,首ci轉染時,請務必對轉染條件進行優(you) 化。例如:24 孔培養(yang) 板,可進行如下交叉實驗:

LabFect

siRNA(pmol)

2ul

20、30、40、50

3ul

20、30、40、50

4ul

20、30、40、50

 

2. 轉染時,細胞生長狀態應保持良好,密度不能過大,培養(yang) 液盡量不要使用抗生素,否則會(hui) 導致細胞死亡增加。

3. 為(wei) 了提高轉染效率,轉染後培養(yang) 板可放於(yu) 微型振蕩器上培養(yang) 或每隔 1 小時人工晃動 1 次。

 

LabFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels

Surface area/well

Vol. of growth medium

Vol. of dilution medium

siRNA Amount

LabFect


(cm2)

(µl)

(µl)

(pmol)

(µl)

96-well

0.3

100

2 x 10

       6

0.6

48-well

0.8

250

2 x 25

15

1.5

24-well

          2

500

2 x 50

30

    3

12-well

         4

1000

2 x 100

60

    6

6-well

10

2500

2 x 250

150

15


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