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Product Center品牌 | 其他品牌 | 貨號 | D2070 |
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供貨周期 | 現貨 |
DiR小動物活體(ti) 成像熒光試劑
產(chan) 品貨號:D2070
存儲(chu) 條件:−20°C幹燥避光
產(chan) 品名稱: DiR (DiIC18(7)1,1’-dioctadecyltetramethyl indotricarbocyanine Iodide)
分子式/分子量: C63H101IN2=1013.4
最大吸收波長/發射波長: 748/780 nm
推薦濾光片設置:710ex/760em
結構式:
圖 1 。取自脾髒的T細胞用DiR進行熒光染色,然後以5×106個(ge) 細胞/隻小鼠的劑量經靜脈注射到Nu/Nu小鼠體(ti) 內(nei) 。圖中顯示的是注射後24小時用IVIS Spectrum拍攝的圖像,顯示細胞向脾髒遷移。
DiR染料是親(qin) 脂性的近紅外花菁熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。18個(ge) 碳的長鏈插入細胞膜中從(cong) 而對細胞進行染色,而細胞間的染料轉移可以忽略不計。DiR的發射的是近紅外熒光可以穿透細胞和組織,在活體(ti) 成像中用來示蹤。DIR一般對原代細胞進行熒光染色並可進行活體(ti) 成像分布觀察,(例如下列細胞embryonic stem cells, bone marrow derived stem cells, adipose derived stem cells, lymphocytes and erythrocytes)
圖2:將25毫克DiR溶解在3毫升乙醇中製備DiR溶液。將199微升的DiR溶液稀釋在5毫升PBS中製備320微克/毫升的工作溶液。從(cong) 脾髒分離出的T細胞用320微克/毫升的DiR溶液孵育30分鍾。在4℃下以1000轉/分鍾離心3分鍾,形成藍色沉澱。用PBS清洗兩(liang) 次,然後將5×10^6個(ge) 細胞通過靜脈注射注入小鼠體(ti) 內(nei) 。對照組用PBS注射5×10^6個(ge) 細胞。在注射後10分鍾、1小時、6小時和24小時,用IVIS光譜儀(yi) 對小鼠進行成像。DiR成像的理想濾光片設置為(wei) 710納米激發和760納米發射。在所有時間點,小鼠均從(cong) 背部和腹部進行成像。在注射後24小時,將大腦、骨骼、脾髒、肝髒、肺部和腎髒取出進行體(ti) 外成像。
非侵入性體(ti) 內(nei) 成像技術能夠實時顯示注射入體(ti) 內(nei) 的T細胞向肝髒和脾髒的歸巢過程,這一過程在體(ti) 外成像中也得到了證實。