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Product Center品牌 | LABLEAD | 貨號 | P1250M |
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供貨周期 | 現貨 |
12% SDS-PAGE快速製膠試劑盒
產(chan) 品貨號:P1250M
儲(chu) 存條件:4ºC保存,需避光。APS促凝劑 -20ºC保存半年內(nei) 有效。
產(chan) 品簡介:
LABLEAD12% SDS-PAGE快速製膠試劑盒提供了簡單快速地配製12% SDS-PAGE凝膠所需的所有試劑,客戶隻需自備製膠器具和蒸餾水,即可配製12% SDS-PAGE凝膠。LABLEAD SDS-PAGE快速製膠試劑盒係列產(chan) 品有6%、8%、10%、12%和15%共5種常見濃度供選擇。本試劑盒把SDS-PAGE凝膠配製所需的Tric-HCl 、Acr-Bis(29:1) 、SDS等預混合成分離膠預混液和濃縮膠預混液,使用前僅(jin) 需加入適量10% APS和TEMED即可簡單快速地完成分離膠和濃縮膠的配製。本試劑盒約可配製約100塊常規大小的12% SDS-PAGE凝膠。具體(ti) 可以配製的凝膠數量和凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關(guan) 。
產(chan) 品組分:
產(chan) 品編號 | 產(chan) 品名稱 | 規格 |
P1250M- 1 | 12% SDS-PAGE分離膠預混液 | 250ml |
P1250M-2 | SDS-PAGE濃縮膠預混液 | 120ml |
P1250M-3 | APS促凝劑 | 5ml |
P1250M-4 | TEMED | 0.5ml |
注意事項:
1、APS促凝劑應於(yu) -20ºC保存。推薦APS分裝後保存。
2、分離膠預混液和濃縮膠預混液中含有Acr-Bis,對人體(ti) 有毒,請做好防護。
3、TEMED易揮發,使用後請蓋緊瓶蓋。另,凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guan) 係密切,可通過適當調節APS和TEMED的用量,控製在不同的室內(nei) 環境下凝膠凝聚的速度。
4、TEMED易燃,有腐蝕性,操作時請小心,並注意有效防護以避免直接接觸人體(ti) 或腐蝕其他物品。
5、本產(chan) 品僅(jin) 限於(yu) 科學研究用,不得用於(yu) 臨(lin) 床診斷或治療,不得用於(yu) 食品或藥品,不得存放於(yu) 普通住宅內(nei) 。
6、為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。
操作步驟:
1. 根據目的蛋白的分子量大小選擇合適濃度的SDS-PAGE分離膠(即分離膠)。 不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離範圍如下(僅(jin) 供參考):
SDS-PAGE分離膠濃度 | 最佳分離範圍 |
6%膠 | 50- 150kD |
8%膠 | 30-90kD |
10%膠 | 20-80kD |
12%膠 | 12-60kD |
15%膠 | 10-40kD |
2. 參考下表,按照1%的比例加入相應的APS促凝劑,按照0.04%的比例加入相應量的TEMED 。例如10ml 12% SDS-PAGE分離膠預混液中,加入100μl APS促凝劑和4μl TEMED。適當混勻後倒入到製膠模具中,用乙醇或蒸餾水封住液麵,直至分離膠凝固充分。通常10-30分鍾內(nei) 膠會(hui) 凝固。
注:具體(ti) 凝固時間和溫度及光照有關(guan) ,為(wei) 達到較好的凝固效果,當室溫較低時,可以適當同時加大10% APS 和TEMED的用量,例如20ºC時建議用量是正常推薦用量的1.5倍,15ºC時建議用量是正常推薦用量的2倍。
成分 | 配製不同體(ti) 積 SDS-PAGE 分離膠所需各成分的體(ti) 積 | |||||
12% SDS-PAGE 分離膠預混液 | 5 ml | 10 ml | 15 ml | 20 ml | 30 ml | 50 ml |
APS 促凝劑 | 0.05 ml | 0.1 ml | 0.15 ml | 0.2 ml | 0.3 ml | 0.5 ml |
TEMED | 2 ul | 4 ul | 6 ul | 8 ul | 12 ul | 20 ul |
3. 參考下表,分離膠凝固後,在SDS-PAGE濃縮膠預混液中,按照1%的比例加入相應量的10% APS溶液,按照 0.1%的比例加入相應量的TEMED。例如10ml SDS-PAGE濃縮膠預混液中,加入100μl APS促凝劑和10μl TEMED,適當混勻。去除分離膠上麵覆蓋的液體(ti) ,盡量去幹淨,然後倒入添加了APS促凝劑和TEMED的 SDS-PAGE濃縮膠預混液,插入梳子待凝固。濃縮膠凝固後即可用於(yu) 後續的電泳。
成分 | 配製不同體(ti) 積 SDS-PAGE 濃縮膠所需各成分的體(ti) 積 | |||||
SDS-PAGE 濃縮膠預混液 | 2 ml | 3 ml | 4 ml | 6 ml | 8 ml | 10 ml |
APS 促凝劑 | 0.02 ml | 0.03 ml | 0.04 ml | 0.06 ml | 0.08 ml | 0.1 ml |
TEMED | 2 ul | 3 ul | 4 ul | 6 ul | 8 ul | 10 ul |
4. 如配製好的凝膠如果當天不使用,可在4ºC保存1-2天後使用。