螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒，該產品為螢火蟲螢光素酶報告基因在哺乳動物細胞中的表達提供快速、靈敏、穩定的檢測方法。能夠檢測zui低 10-20 mol 的螢光素酶，在 10-14 至 10-20 mol 的酶濃度範圍內呈很好的線性關係

Firefly Luciferase Assay Kit（螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒）

貨號：DR024-100T

儲(chu) 存條件

-80℃保存。螢火蟲螢光素酶檢測液（B+C）混合液不可反 複凍融，建議進行小批量分裝，並於(yu) -20℃（最長可儲(chu) 存1個(ge) 月）或-80℃（最長可儲(chu) 存 1 年）條件下儲(chu) 存。

產(chan) 品介紹

真核基因表達調控研究常用的方法是進行報告基因的檢測，生物發光法又是報告基因檢測zui常用的有效手段。螢光素酶能催化底物螢光素的轉化，並發射出光子。該產(chan) 品為(wei) 螢火蟲螢光素酶報告基因在哺乳動物細胞中的表達提供快速、靈敏、穩定的檢測方法。能夠檢測最di 10-20 mol 的螢光素酶，在 10-14 至 10-20 mol 的酶濃度範圍內(nei) 呈很好的線性關(guan) 係。

產(chan) 品優(you) 點

1. 快速：細胞裂解在 10-15 min 內(nei) 完成。

2. 方便：試劑易於(yu) 配製，樣品檢測步驟簡單。

3. 靈敏：能夠檢測最di10-20 mol 的螢光素酶。

4. 酶的濃度線性範圍可達 8 個(ge) 數量級。

使用方法

1. 細胞裂解

（1）將轉入報告基因的細胞中的培養(yang) 基移除，加 PBS 輕輕洗滌（貼壁細胞可直接進行此操作，懸浮細胞要離心收集細胞）。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用無菌水按 4:1 稀釋A 組分)，然後將培養(yang) 板放在微型震蕩器上室溫震蕩 15 min，充分裂解細胞。

注：裂解產(chan) 物可室溫保存 6 h，-70℃可長期存放（裂解產(chan) 物不能多次反複凍融）。

（2）將充分裂解後的裂解產(chan) 物，10000-15000 rpm 離心 3-5min。離心後將上清液移入新的 EP 管中進行後續檢測。

2. 螢光素酶檢測

（1）按照儀(yi) 器說明書(shu) 將熒光測定儀(yi) 打開，設定參數，測定時間為(wei) 10 s，測定間隔為(wei) 2 s。

（2）將細胞裂解產(chan) 物按照 20~100 µL 的體(ti) 積加入測量管中（保持每次樣品量一致），另外加入 100 µL 螢火蟲螢光素酶檢測液，充分混勻後測定 RLU（Relative light unit）。

注：螢火蟲螢光素酶檢測液不能反複凍融，若單次實驗用量較少，建議按照單次使用量分裝成小規格。

注意事項

1. 溫度會(hui) 對酶的活性產(chan) 生影響，因此所有試劑應放置室溫後再使用。

2. 如果單管熒光測定儀(yi) 測定，每個(ge) 樣品與(yu) 測定試劑混合後到測定前的時間應保持一致。

3. 螢火蟲螢光素酶催化的生物發光的zui強波長為(wei) 560 nm。

4. 為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

5. 本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研。