基質膠-高濃度含酚紅
基質膠是從Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性細胞培養基質，含有豐富的細胞外基質蛋白，主要包括層粘連蛋白、膠原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生長因子。

高濃度基質膠-含酚紅

貨號：MG2248、MG4248、MG6248

存儲(chu) 條件：-80℃ 保存，避免反複凍融。

產(chan) 品簡介：

基質膠是從(cong) Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性細胞培養(yang) 基質，含有豐(feng) 富的細胞外基質蛋白，主要包括層粘連蛋白、膠原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生長因子。

基底膠在室溫條件下，聚合形成具有生物學活性的三維基質，模擬體(ti) 內(nei) 細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利於(yu) 體(ti) 外細胞的培養(yang) 和分化，以及對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。基質膠也適用於(yu) 類器官生長、分化、代謝和毒理學研究。高濃度的基質膠可以用於(yu) 動物體(ti) 內(nei) 成瘤實驗的細胞包被。

操作方法：

一、薄膠成膠方法：

1. 凍融後，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。

2. 將需要使用的培養(yang) 板置於(yu) 冰上，加入濃度為(wei) 50μL/cm2 生長麵積的基質膠。

3. 在 37℃放置 30 分鍾，即可使用。

二、厚膠成膠方法：

1. 凍融後，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。

2. 將需要使用的培養(yang) 板置於(yu) 冰浴，將培養(yang) 的細胞與(yu) 基質膠混合，用移液槍頭使其懸浮於(yu) 基質中。加入濃度為(wei) 150-200μL/cm

2 生長麵積的基質膠。

3. 在 37℃放置 30 分鍾，可成膠。可以加入細胞培養(yang) 的基質，也可使細胞直接生長在膠表麵。

三、薄層包被方法：

1. 凍融後，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。

2. 根據使用需要，采用無血清培養(yang) 基稀釋基質膠。根據實驗需要確定最佳包被濃度。

3. 將稀釋的 基質膠包被於(yu) 所需的培養(yang) 器皿中，包被量至少覆蓋整個(ge) 器皿的生長表麵。室溫下孵育 1 小時。

4. 去除未結合的基質膠，用無血清培養(yang) 基輕輕地衝(chong) 洗。

四、裸鼠成瘤實驗

1.取處於(yu) 對數生長期腫瘤細胞，即細胞融合度達到80%~90%。

2.棄去瓶內(nei) 培養(yang) 液，用PBS清洗2遍，加入0.25%含EDTA的yimei0.8~1.0 ml中，將培養(yang) 瓶平放靜置1 min，倒置顯微鏡下觀察細胞狀態，在細胞逐漸變圓或有細胞脫落時加入5 mlwanquan培養(yang) 液終止消化。

3.吹打管輕柔吹打細胞懸液，進行細胞計數。

4.取一定數量（每隻小鼠不低於(yu) 1X10^5細胞量，最高不超過1X10^7細胞/0.1ml終濃度）細胞放入15 ml離心管中，200×g離心3 min，棄上清液，用已預冷的移液器及吸頭將基質膠和含10%FBS的腫瘤細胞wanquan培養(yang) 液的1∶1混懸液加入離心管，輕柔吹打，避免產(chan) 生氣泡，均勻重懸細胞，冰上放置。

5.麻醉5-6w齡的裸鼠，提前預冷微量進樣器和針頭，用不帶針頭的 1mL 注射器將細胞和膠的混合物吸入針頭，再裝上16G-29G針頭在每隻裸鼠右側(ce) 背部皮下接種，左右輕柔晃動，預留細胞懸液空間，注射量為(wei) 400 μl/隻。

6.動物經過上述處理後，每周定期觀察裸鼠生長狀況，用遊標卡尺對瘤體(ti) 的長度（L）、寬度（W）進行測量。體(ti) 積大小按公式：V=1/2LW2進行計算。

注意事項：

1.收到產(chan) 品並確認到貨情況無異常後，請將 基質膠儲(chu) 存於(yu) --80℃冰箱，短暫使用可置於(yu) --20℃冰箱。切勿將基質膠儲(chu) 存於(yu) 自動除霜的冰箱中。在第一次融化後請分裝保存，應避免基質膠反複凍融。

2.因基質膠在 10℃以上即可成膠，在操作過程中，保持基質膠一直置於(yu) 冰上，所有接觸的細胞培養(yang) 器皿，移液吸頭，分裝管等都必須預冷後使用。

3.所有操作均需在無菌環境下進行，試劑瓶瓶蓋可用 70％乙醇擦拭，並自然幹燥。應使用預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。

溶解時可將基質膠基質置於(yu) 4℃冰箱內(nei) 冰上過夜溶解。成膠後基質膠可以在 4℃ 24－48 小時後重新呈液態。