DAPI染料。是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結合後可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。

DAPI染料

產(chan) 品貨號：DAPI01-1

儲(chu) 存條件：2-8℃。常溫運輸。粉末在室溫下穩定，需避光儲(chu) 存。

產(chan) 品描述

DAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結合後可以產(chan) 生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI染色常用於(yu) 細胞凋亡檢測，染色後用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀(yi) 檢測。DAPI也常用於(yu) 普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的最da激發波長為(wei) 340nm，最da發射波長為(wei) 488nm；DAPI和雙鏈DNA結合後，最da激發波長為(wei) 364nm，最da發射波長為(wei) 454nm。本DAPI溶液用水配製，加熱有助於(yu) 溶解。

用於(yu) 細胞核染色時，推薦的DAPI工作濃度為(wei) 0.5-10μg/ml。

配製母液

用雙蒸水溶解，終濃度為(wei) 1mg/ml。本產(chan) 品不可以用緩衝(chong) 液直接溶解。-20℃可保存1年，建議分裝保存，避免反複凍融。

使用方法

1.配製工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配製成所需要的工作的濃度（0.5-10μg/ml）。

2.固定的細胞或組織染色：

對於(yu) 固定的細胞或組織樣品，固定後，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最後進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI染色。

a)對於(yu) 貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。

對於(yu) 懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體(ti) 積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鍾。

b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鍾。

c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片後熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm，發射波長460nm。

3.活細胞或組織染色：

a)細胞培養(yang) 物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養(yang) 基體(ti) 積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對於(yu) 六孔板一個(ge) 孔需加入1ml染色液，對於(yu) 96孔板一個(ge) 孔需加入100μl染色液。

b)在37℃培養(yang) 細胞 10～20 分鍾。

c)用PBS或合適的緩衝(chong) 液洗細胞兩(liang) 次。

d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片後熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm，發射波長460nm。

注意事項

1)DAPI對人體(ti) 有一定刺激性，請注意適當防護。

2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色後盡量當天完成檢測。

3)為(wei) 減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4)為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。