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Product Center品牌 | 其他品牌 | 貨號 | G1042 |
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規格 | 100ml,250ml | 供貨周期 | 現貨 |
考馬斯亮藍快速染色液
產(chan) 品貨號:G1042
存儲(chu) 條件:密封,室溫存儲(chu) ,一年有效。
產(chan) 品簡介
LABLEAD一步法快速蛋白染色液是已配製好可直接使用的蛋白凝膠電泳染色劑,速度快,靈敏度高, 安全無毒,效果好。該產(chan) 品是真正的實現一步蛋白染色。隻需簡單的從(cong) 電泳槽中取出凝膠、放入染色劑中,就可離開了。無需漂洗、微波加熱、固定或脫色。凝膠的蛋白條帶2分鍾內(nei) 即可見。凝膠可以無限期留在染色液中, 隻有蛋白質被染色,不會(hui) 增加背景染色。
產(chan) 品特色
① 方便快捷-不用漂洗,不用加熱,不用脫色,不用固定,條帶 2 分鍾可見。
② 安全環保-不含任何有害的腐蝕性強酸(如:磷酸、鹽酸、乙酸等),不含任何對人體(ti) 有害的甲醇和乙醇。
③ 靈敏度高-檢測下限2ng蛋白。
④ 兼容性好-適用於(yu) 變性和非變性膠以及質譜分析。
注意事項
1、在染色之前,不需要或不建議進行多次清洗。
2、不需要也不建議在用前采取酒精/乙酸固定步驟。
3、凝膠可以在染色1小時後儲(chu) 存在超純水中。凝膠也可以長時間留在染色液中, 隻有蛋白質被染色,不會(hui) 增加背景染色。
4、染色液可以重複利用2-3次,靈敏度會(hui) 有輕微下降,如重複使用請延長染色時間。
染色的步驟
1、將電泳後的凝膠取下放入染色容器中,用適量蒸餾水漂洗一下。
2、棄蒸餾水,加入適量染色液(以覆蓋過膠麵為(wei) 宜),在室溫下進行溫和的搖晃後達到適當的強度。
3、觀察記錄凝膠。
待檢測蛋白量 | 染色時間 |
>1 μg | 2min |
100ng-1μg | 10min |
25ng-100ng | 30min |
2ng-25ng | 60min |
凝膠幹燥的步驟
1、確保凝膠染色至少1小時。雖然蛋白質帶在染色幾分鍾後就會(hui) 顯現,但染色過程通常在1小時培養(yang) 後完成。根據你使用的凝膠類型,可能需要更長的孵化時間。在完成染色過程之前進一步加工凝膠可能導致蛋白質的脫色和靈敏度降低。如果發生這種情況,隻需在染色液中進行隔夜孵化,即可保留凝膠。
2、將凝膠浸入大約100ml的超純水中,溫度為(wei) 70°C(在微波爐中加熱30到60°C)。在輕輕搖晃的同時至少孵化1小時。可加入選擇性吸附紙或紙巾。凝膠可以在水中隔夜孵化。
3、在“凝膠幹燥溶液"(如4%甘油,20%乙醇在水中)中孵化凝膠2min。在酒精溶液中孵出任何帶有考馬斯亮藍的凝膠,最終都會(hui) 導致條帶的染色,因此避免孵出時間超過5min。
4、這種凝膠現在可以在濕的玻璃紙膜之間幹燥了。
用於(yu) 質譜(MS)分析的處理步驟
1、切除染色的目標蛋白帶並轉移到一個(ge) 幹淨的EP管。
2、加入1ml 30%乙醇或 30%丙酮或 30%乙酸(注意:乙酸可能導致N-端的乙酰化)。
3、孵化20min(在 60°C–70°C 孵化,以提高脫色效率)。
4、至少三次重複第 2 和第 3 步,或直到凝膠清晰。
常見問題
常見問題 | 解決(jue) 辦法 |
染色原理是什麽(me) ? | 與(yu) 經典考馬斯亮藍 G250 染色原理相同(與(yu) 蛋白質中堿性氨基酸結 合),優(you) 點是更加快速和更高的靈敏度。 |
染色後的凝膠能做質譜分析嗎? | 可以。請參閱“用於(yu) 質譜(MS)分析的處理步驟"。 |
能重複使用嗎? | 可以重複使用 2-3 次。 但靈敏度有所下降,可以通過延長染色時間來彌補。 |
染膠的best溫度是多少? | 為(wei) 達到best的染色效果,推薦常溫(20-25℃)染色。 |
需要低溫貯存嗎? | 不需要低溫貯存,常溫貯存(20-25℃)即可。4-8℃貯存,會(hui) 有結晶 產(chan) 生,37℃溫浴融化後可繼續使用。 |
染色後,凝膠可以用蒸餾水保存嗎? | 可以,蒸餾水保存更加簡單,也可以保存在染色液中。 |
染色的凝膠能做 Western Blot 嗎? | 不可以。蛋白的染色是不可逆的,染色的凝膠不能用作下遊的轉膜操 作。 |
為(wei) 什麽(me) 凝膠過夜染色後條帶出現塗抹狀拖尾? | 過夜染色不會(hui) 對凝膠過度染色。 出現抹塗狀拖尾原因是:上樣量太大或分子量較小導致。 |
該染色液有固定凝膠的作用嗎? | 沒有固定凝膠的作用。由於(yu) 染色會(hui) 在 60 分鍾內(nei) 完成,染色前無需對 凝膠進行固定。 |